В настоящее время VirtualBox может быть запущен под большинством современных операционных систем: Windows, Linux, Macintosh и Solaris. Продукт поддерживает работу с большим числом гостевых операционных систем, включая семейство Windows (NT 4.0, 2000, XP, Server 2003, Vista, Windows 7), DOS/Windows 3.x, Linux (2.4 и 2.6), Solaris и OpenSolaris, OS/2, и OpenBSD.